河南靠譜的HE染色公司

HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少，幅度太?。豢裳娱L脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進去，在切片染色完成后留下了點狀的不著**域）：更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質量不佳（偶有試劑瓶內裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗證。8)烤片時間短，切片上水分沒有烤干，也會導致著色不勻，出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域。HE染色結果如何分析和讀片？河南靠譜的HE染色公司

HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法，是**基本的病理學染色技術。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍，如處理適宜，可使細胞核著清楚的深藍色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。質量好的HE具備條件1.細胞核與細胞漿藍紅相映，鮮艷亮麗；2.胞核鮮明、核膜、核染色質顆粒均清晰可見；3.組織或一般結構特點及假物質成分均能顯示出來。江蘇質量好的HE染色公司關于HE染色，你不知道的實驗技巧。

HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞，胰酶消化，調整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應時間后，取出細胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后，中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可

HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因：切片封片前放置在空氣中時間太長，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘，然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤，盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因：蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過度應及時更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍化時間。HE染色 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一。

HE染色常見問題：Q3：細胞核染色過淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過短，或蘇木素過度氧化失效，或分化時間太長。對策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個3-5min即可，接著重新染色?？梢赃m當?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來水沖洗10min染色。Q4：細胞核染色過深，胞漿著藍色答：切片在蘇木素染液中停留過長；或切片太厚；或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。HE染色，一站式實驗外包服務平臺。海南HE染色

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HE染色常見問題：Q5：細胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化；或蘇木素染色后反藍不足導致。應該立即更換蘇木素染色液?；蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當浸泡，這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調整實驗步驟。河南靠譜的HE染色公司