徐州組織芯片免疫組化

免疫組化即用型二步法的具體實驗流程步驟簡介：1、脫蠟、水化組織切片；2、根據(jù)所應(yīng)用的一抗的特殊要求，對組織切片進(jìn)行預(yù)處理；3、0.3%或3%H2O2去離子水孵育5分鐘-30分鐘，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，PBS或TBS沖洗；4、滴加一抗，室溫或37℃孵育30~60分鐘，或4℃過夜，PBS或TBS浸洗3分鐘×5次；5、滴加enhangcer增強劑，37℃30min，PBS或TBS浸洗3分鐘×5次；6、滴加通用型IgG抗體-Fab段-HRP多聚體，室溫/37℃孵育30分鐘-1h，PBS/TBS沖洗，3分鐘×5次；7、應(yīng)用DAB溶液顯色；8、蒸餾水沖洗、復(fù)染、脫水、透明、封片。為減少背景干擾，選用合適的修復(fù)液，封閉液，單克隆一抗等對提高免疫組化結(jié)果質(zhì)量至關(guān)重要。徐州組織芯片免疫組化

免疫組化技術(shù)，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理—抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistochemistry）或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)（immunocytochemistry），是研究蛋白質(zhì)在組織細(xì)胞中分布、功能狀態(tài)及動態(tài)變化的強有力工具。免疫組化技術(shù)具有高靈敏度、高選擇性和無放射性污染的特點，其結(jié)果容易數(shù)字化和圖像處理，是一種實用性和準(zhǔn)確性高的分子生物學(xué)技術(shù)。在臨床醫(yī)學(xué)研究中，免疫組化被廣泛應(yīng)用于Ca組織結(jié)構(gòu)及特異性結(jié)構(gòu)物的鑒定，幫助醫(yī)生確定病變的類型、分級和分期，進(jìn)一步指導(dǎo)臨床醫(yī)療和預(yù)后判斷。北京組織芯片免疫組化分析免疫組化的應(yīng)用有那些？

免疫組織化學(xué)染色方法：1、按標(biāo)記物質(zhì)的種類，如熒光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶）、鐵蛋白、膠體金等，可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2、按染色步驟可分為直接法（又稱一步法）和間接法（二步、三步或多步法）；與直接法相比，間接法的靈敏度提高了許多。3、按結(jié)合方式可分為抗原—抗體結(jié)合，如過氧化物酶-抗過氧化物酶法和親和連接，如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC）法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)（SP）法等，其中SP法是常用的方法。

免疫組化的常見問題分析：1. IHC實驗結(jié)果顯色過深：抗?jié)舛冗^高或孵育時間過長——降低一抗?jié)舛然驕p少孵育時間；孵育溫度過高——選擇4℃或室溫孵育。2. 實驗結(jié)果存在非特異性顯色：石蠟切片脫蠟不徹底——延長脫蠟時間；蛋白封閉不充分——增加蛋白封閉時間；組織富含內(nèi)源性生物素與過氧化物酶——使用相關(guān)試劑進(jìn)行封閉。3. 實驗結(jié)果顯色弱或無染色：抗?jié)舛冗^低或孵育時間過短——增加一抗?jié)舛然蜓娱L孵育時間；組織中無目的抗原的表達(dá)；抗種屬來源與二抗不匹配。在進(jìn)行免疫組化時，如何選擇合適的一抗以確保實驗準(zhǔn)確性？

一份免疫組化的報告，里面會有很多的加號(+)，和減號(-)。那么這些加號和減號是什么意思呢?加號越多是說我們的疾病嚴(yán)重程度越高嗎?不用擔(dān)心，并不是這樣的。免疫組化中的(+)，也就是指陽性，指切片中的某些細(xì)胞表達(dá)特定的免疫標(biāo)記，而(-)即陰性，指這些細(xì)胞不表達(dá)這些免疫標(biāo)記。這些免疫標(biāo)記的陽性與陰性表示了細(xì)胞的來源，也就是說我們是通過這些不同標(biāo)記的陽性陰性來認(rèn)識這些細(xì)胞，從而給這些細(xì)胞貼上"名片”的。所以這些(+)(-)與疾病的嚴(yán)重程度或者惡性程度沒有關(guān)系。免疫組化技術(shù)有助于鑒別不同的細(xì)胞類型。中山免疫組化

在進(jìn)行TMA組織芯片免疫組化染色時，如何注意實驗細(xì)節(jié)？徐州組織芯片免疫組化

免疫組化，全稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)（Immunohistochemistry），是結(jié)合了免疫學(xué)與組織化學(xué)原理的一種檢測技術(shù)。它利用抗原與抗體之間特異性的相互作用，通過將標(biāo)記（如熒光素、酶標(biāo)記）的特異性抗體應(yīng)用于組織或細(xì)胞切片上，來識別和定位組織或細(xì)胞內(nèi)的目標(biāo)抗原，如蛋白質(zhì)或多肽。這一過程不 能夠顯示出目標(biāo)分子在細(xì)胞或組織中的分布情況，還能對其進(jìn)行定性、定量分析，甚至達(dá)到亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的分辨率。免疫組化技術(shù)是病理學(xué)、生物醫(yī)學(xué)研究中不可或缺的工具，對于疾病的診斷、了解疾病發(fā)生機制、指導(dǎo)臨床醫(yī)療方案（尤其是Tumor學(xué)領(lǐng)域）具有重要意義。徐州組織芯片免疫組化