江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質組學研究

蛋白質的N-糖基化特征是一個關鍵的質量屬性。它會影響生物制藥的安全性和有效性，因此需要在開發(fā)和生產過程中進行表征和監(jiān)測。常見的聚糖分析工作流程是用PNGase F釋放N-聚糖，然后用熒光標記物（如2-AB、2-AA、普魯卡因胺或RapiFluor-MS?（沃特世公司））標記生成的聚糖。然后使用HILIC-HPLC或毛細管電泳分離標記的聚糖，以表征和定量不同的聚糖結構。 在這里，使用游離聚糖方法分析zhiliao性抗體曲妥珠單抗、Fc-融合蛋白依那西普和糖蛋白RNase B的N-聚糖。曲妥珠單抗和依那西普在天然條件下在37°C下用Genvois的PNGase F去糖基化1小時，而RNase B需要變性和還原才能完全去糖基化。因此，在50°C下用PNGase F去糖基化10分鐘之前，用RapiGest? SF表面活性劑（沃特世公司）和TCEP處理RNase B。 用RapiFluor-MS標記所得游離的聚糖，并通過HILIC UPLC-FLD-MS進行分析。C1抑制劑的去糖基化：使用PNGaseF、OglyZOR和SialEXO、GalNAcEXO1。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質組學研究

genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖：為了確認依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù)，進行了釋放的N-聚糖分析。標記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失，如半乳糖基化聚糖物種的信號丟失所示。該酶是一種有價值的工具，可降低樣品異質性，用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc；2. 實現(xiàn)完全糖基去除，以改善蛋白質表征；3. 可固定在即用型離心柱中。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學研究Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。

GlycOCATCH設計用于特異性結合粘蛋白型O-糖基化蛋白和肽。親和樹脂基于無活性的Genovis的OpeRATOR酶，該酶經過工程設計，可以高親和力結合O-糖基化蛋白和肽。 結合在pH 5-8的生理緩沖液中進行。由于GlycOCATCH樹脂和O-糖蛋白/肽之間的強相互作用，可以用8M尿素進行洗脫。或者，可以使用活性OpeRATOR酶進行洗脫，該酶消化O-聚糖位點的N末端結合的O-糖蛋白。在后一種情況下，肽在天然條件下回收。OpeRATOR 凍干酶包含在購買中。由于 O-糖蛋白上的旋亞氨酸化 O-聚糖與樹脂結合效率更高，因此唾液酸酶混合物 SialEXO 凍干也包含在購買中。

Genovis 集團由瑞典 Genovis AB 和美國全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達克北方增長市場上市。如需了解更多信息，請訪問投資者關系。 Genovis的經營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具，以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis 酶產品，稱為 SmartEnzymes，被世界各地的科學家使用，創(chuàng)新的產品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質量控制。 通過在2020年收購QED Bioscience，產品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在 網站 上閱讀有關QED的更多信息 Genovis 研發(fā)活動的基石是客戶關系，使產品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學術團體的合作同樣有價值。實現(xiàn) O-糖譜分析、位點占用測定和 O-糖肽圖譜以及使用 LC-MS 分析的中級方法。

用于水解β1-3,4-連接半乳糖的固定化酶在離心柱中的糖蛋白上。Genovis的GalactEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的GalactEXO酶，用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解，而不會用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. z終樣品中不含酶。GalactEXO 酶來源于 Akkermansia muciniphila 并重組表達，可有效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖。GalactEXO微離心柱經過格式化，可在30-60分鐘內水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。實現(xiàn)高通量 N-糖去除，簡化糖蛋白底物的下游分析。安徽PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

PNGase F是一種非常成熟的工具。O-糖的去除可能更具挑戰(zhàn)性，現(xiàn)有的O-糖釋放化學方法不太適合下游分析。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質組學研究

在抗體藥物及核酸藥物領域，倍篤生物產品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等，品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產品牌都具有國內自研、自產能力，批次生產穩(wěn)定可靠、品質可控，為行業(yè)發(fā)展提供更多國產選擇。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質組學研究