昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0...

PS不是你想有，想有就能有，迄今為止所發(fā)現(xiàn)的外泌體，并非所有的外膜表面都暴露PS。例如，細(xì)菌來源的外泌體膜表面沒有PS，因此，本款試劑不能提取這種外泌體?，F(xiàn)在的研究尚未得知是否所有的外泌體上都會露出PS，但是上述的外泌體標(biāo)記根據(jù)細(xì)胞種類不同表現(xiàn)出的信號強(qiáng)弱差大...

RNA提取注意事項(xiàng)：所有實(shí)驗(yàn)所用的泵頭、離心管等消耗品均要使用RNase-free的；整個(gè)過程要在無RNase污染的條件下進(jìn)行，通?？梢栽跓o菌操作臺中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并用75%的酒精進(jìn)行擦拭殺菌，如有必要也可在實(shí)驗(yàn)前噴灑一些商用的RNase壓制劑；所有相關(guān)溶液的配制...

細(xì)胞外基質(zhì)成分居然能調(diào)節(jié)葡萄糖代謝過程：細(xì)胞具有不同的機(jī)制以感知和響應(yīng)外在代謝信號。例如，細(xì)胞通過mTORC1感知營養(yǎng)素可用性并相應(yīng)地在分解代謝和合成代謝狀態(tài)之間轉(zhuǎn)換來協(xié)調(diào)全身和細(xì)胞代謝;生長因子，和細(xì)胞因子可以將代謝信號傳遞給相鄰細(xì)胞和遠(yuǎn)端組織，作為更普遍的...

原代細(xì)胞的幾大特點(diǎn)：1、生命的起源原代細(xì)胞人體起源一個(gè)單細(xì)胞受精卵(*代干細(xì)胞)，經(jīng)歷卵裂(干細(xì)胞持續(xù)擴(kuò)增，增加細(xì)胞數(shù)量)、胚層出現(xiàn)(干細(xì)胞開始分化出功能細(xì)胞)、組織部位形成(功能細(xì)胞的有序排列)及胚后發(fā)育這樣一個(gè)連續(xù)過程。2、維持人體動態(tài)平衡的種子細(xì)胞人體通...

外泌體：已經(jīng)有研究報(bào)道了各種Hh的胞外轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，但實(shí)際用于體內(nèi)Hh分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)的途徑尚不清楚。該研究顯示Hh在果蠅翅膀成蟲盤的分泌依賴于運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合物（ESCRT）。在體內(nèi)，產(chǎn)生Hh的細(xì)胞中ESCRT活性的降低導(dǎo)致外部細(xì)胞表面保留Hh。此外，產(chǎn)生Hh的...

原代細(xì)胞培養(yǎng)問題：凍存的細(xì)胞該如何開始培養(yǎng)：(1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。(4)用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦...

由歐洲多國細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域的學(xué)者發(fā)起并成立的國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會（ISEV）于2014年在協(xié)會會刊JournalofExtracellularVesicles發(fā)表了一個(gè)指導(dǎo)性意見，也就是我們常說的MISEV2014。2018版《指導(dǎo)要求》進(jìn)行了修訂。2018版的《...

原代細(xì)胞的分離與培養(yǎng)：從組織制備原代細(xì)胞，即使捱過了極其嚴(yán)苛的解離步驟，不嚴(yán)謹(jǐn)?shù)姆蛛x操作可能會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢、表型不一致甚至細(xì)胞污染，特別是由于組織中可能含有細(xì)菌等微生物，污染問題對于原代細(xì)胞的分離和培養(yǎng)是一個(gè)很大的隱患。而為了讓研究人員不再為這些問題頭疼，...

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻，避免劇烈搖晃?；靹蚝螅瑢⒃嚬芄潭ù怪狈胖糜陔x心分離器，在頂部記錄抽血的準(zhǔn)確時(shí)間，因?yàn)槌檠c離心之間的時(shí)間間隔可能是一個(gè)影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比...

外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽...

細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)（cytoplasmicmatrix；cytoplasmicgroundsubstance；groundplasm）是除去能分辨的細(xì)胞器和顆粒以外的細(xì)胞質(zhì)中膠態(tài)的基底物質(zhì)，現(xiàn)又稱細(xì)胞溶膠。蛋白聚糖的主要成份是糖胺聚糖,是由重復(fù)二糖單位構(gòu)成的無分支長鏈...

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到...

細(xì)胞外基質(zhì)的成分：構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的大分子種類繁多，可大致歸納為四大類：膠原、非膠原糖蛋白、氨基聚糖與蛋白聚糖、以及彈性蛋白（圖10-1，2）。上皮組織、肌組織及腦與脊髓中的ECM含量較少，而結(jié)締組織中ECM含量較高。細(xì)胞外基質(zhì)的組分及組裝形式由所產(chǎn)生的細(xì)胞決定...

外泌體提?。撼叽缗抛枭V。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實(shí)現(xiàn)分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據(jù)其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長的時(shí)間才能通過色譜柱的孔隙遷移，而大分...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平mi...

細(xì)胞外基質(zhì)的組成可分為三大類：①糖胺聚糖(glycosaminoglycans)、蛋白聚糖(proteoglycan),它們能夠形成水性的膠狀物，在這種膠狀物中包埋有許多其它的基質(zhì)成分；②結(jié)構(gòu)蛋白，如膠原和彈性蛋白，它們賦予細(xì)胞外基質(zhì)一定的強(qiáng)度和韌性；③粘著蛋...

什么是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）：多細(xì)胞生物，不光由細(xì)胞組成，還包括分布于細(xì)胞外空間的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）由三維網(wǎng)構(gòu)成，除了蛋白聚糖和葡糖胺聚糖，膠原蛋白，彈力蛋白和基礎(chǔ)纖維之外，在這個(gè)空間里還有血管，淋巴管和神經(jīng)末梢，防御細(xì)胞和基底膜。ECM...

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白聚糖（proteoglycan）：蛋白聚糖是氨基聚糖（除透明質(zhì)酸外）與*蛋白質(zhì)（coreprotein）的共價(jià)結(jié)合物。*蛋白質(zhì)的絲氨酸殘基（常有Ser-Gly-X-Gly序列）可在高爾基復(fù)合體中裝配上氨基聚糖（GAG）鏈。其糖基化過程為通過逐個(gè)轉(zhuǎn)...

這種有限的分裂能力體內(nèi)的細(xì)胞相似，一旦細(xì)胞在體內(nèi)完全分化以發(fā)揮其特殊功能，細(xì)胞將停止增殖-這是固有的保護(hù)性衰老過程。此外，某些原代細(xì)胞有絲分裂后，無論是在體內(nèi)或體外培養(yǎng)中都不增殖（例如，神經(jīng)元，骨骼肌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，周細(xì)胞，終末分化的肝細(xì)胞）。因此，每次進(jìn)行實(shí)...

細(xì)胞外基質(zhì)偶聯(lián)調(diào)控細(xì)胞單層的受力反應(yīng)：上皮細(xì)胞在基底上因受彈性、邊緣和界面三個(gè)效應(yīng)的共同作用，可以形成形態(tài)豐富的粘著單層。細(xì)胞通過粘著斑感受其外界環(huán)境，可看作是細(xì)胞與基質(zhì)之間的機(jī)械連接。之前的力生物學(xué)研究主要集中于單個(gè)細(xì)胞，而來自美國賓州大學(xué)的張宿林教授等卻探...

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來眾多文獻(xiàn)報(bào)道，肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展，是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%，而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%，...

細(xì)胞傳代的方法都有哪些：根據(jù)不同的細(xì)胞采取不同的方法。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細(xì)胞用直接吹打即可傳代；懸浮生長的細(xì)胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打。原代培養(yǎng)的開始傳代應(yīng)注意的問題？細(xì)胞沒有生長到足以覆蓋瓶底...

膠原酶的配制：建議看相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行膠原酶的配制。小編常用的是DMEM進(jìn)行配制，配制好的膠原酶消化液放置在37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱（注意現(xiàn)用現(xiàn)配）。胰酶（酶聯(lián)合法獲取原代細(xì)胞中會加入胰酶，相關(guān)文章也蠻多的）膠原酶消化時(shí)間：根據(jù)組織特性，消化時(shí)間會有差異。以小鼠腎細(xì)胞為...

專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來進(jìn)行體外培養(yǎng)，直接把外泌體從尿液中沉降下來，無須分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基。人尿液來源細(xì)胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基，將人尿液來源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾，以...

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)方法：1.當(dāng)細(xì)胞達(dá)到80-90%融合時(shí)需要傳代培養(yǎng)。2.提前準(zhǔn)備好多聚賴氨酸（PLL，貨號0403）或纖維粘連蛋白（BPF，貨號8248）包被好的培養(yǎng)瓶。3.將完全培養(yǎng)基，胰酶/EDTA消化液（T/E，貨號0103），胰胰中和液（TNS，貨號0...

膠原酶的配制：建議看相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行膠原酶的配制。小編常用的是DMEM進(jìn)行配制，配制好的膠原酶消化液放置在37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱（注意現(xiàn)用現(xiàn)配）。胰酶（酶聯(lián)合法獲取原代細(xì)胞中會加入胰酶，相關(guān)文章也蠻多的）膠原酶消化時(shí)間：根據(jù)組織特性，消化時(shí)間會有差異。以小鼠腎細(xì)胞為...

外泌體提?。撼叽缗抛枭V。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實(shí)現(xiàn)分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據(jù)其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長的時(shí)間才能通過色譜柱的孔隙遷移，而大分...

這種有限的分裂能力體內(nèi)的細(xì)胞相似，一旦細(xì)胞在體內(nèi)完全分化以發(fā)揮其特殊功能，細(xì)胞將停止增殖-這是固有的保護(hù)性衰老過程。此外，某些原代細(xì)胞有絲分裂后，無論是在體內(nèi)或體外培養(yǎng)中都不增殖（例如，神經(jīng)元，骨骼肌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，周細(xì)胞，終末分化的肝細(xì)胞）。因此，每次進(jìn)行實(shí)...

原代細(xì)胞培養(yǎng)：組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，較簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘，若懸液量大，可適當(dāng)延長離心時(shí)間，但速度不能太高，延時(shí)也不能太長，以避免擠壓或機(jī)械損傷細(xì)胞，離心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次，用培養(yǎng)基洗一次后，調(diào)...